AUC实验中,蓝宝石VS石英视窗,应该如何选择?
在分析型超速离心机(AUC)实验中何时使用石英和蓝宝石观察窗?
通常,在紫外吸光度模式下,AUC实验通常使用石英观察窗,因其在短波长紫外线下透光性更出色。在干涉模式下,通常使用蓝宝石窗,因其具有更高的机械强度。
蓝宝石与石英观察窗的特点
1.蓝宝石/石英光学元件性能相当
图A、图B和图C分别显示空气、缓冲液和BSA蛋白样品实验中Rubicon ES2蓝宝石(红线)和石英(蓝线)强度扫描结果。(D)为两种观察窗的BSA蛋白吸光度曲线。(E和F)显示两种观察窗的透光率曲线。在约230 nm的短波紫外线条件下(肽键峰),蓝宝石窗和石英窗的光学性能相当。
2.蓝宝石/石英光学元件AUC实验结果也相当
图A、图B和图C分别显示230 nm、240 nm和280 nm波长条件下使用蓝宝石窗(红线)和石英窗(蓝线)以25,000rpm进行BSA蛋白样品SV-AUC实验的结果分析。图D显示50,000rpm下的干涉结果。沉降系数总体分布重叠,表明两种观察窗材料得到相同结果。
3.蓝宝石视窗可获得更好的干涉数据
与石英观察窗相比,Rubicon ES2蓝宝石观察窗具有更优越的机械强度,在高速运转(>50k rpm)下变形更小。这不会影响吸光度数据,但会影响干涉数据的质量。本表显示信噪比,从中可看出石英窗干涉数据的劣化。
小结
在AUC实验吸光度模式中波长低至230 nm时,新一代Rubicon ES2蓝宝石观察窗的性能与石英观察窗相当。在高速应用(例如多肽,抗体等蛋白样品分析)中,蓝宝石视窗搭配干涉扫描模式性能更佳。
*分析软件尚未经过贝克曼库尔特生命科学公司验证或确认
仅用于科研,不用于临床诊断。